Show simple item record

dc.contributor.advisorGürbay, Aylin
dc.contributor.authorPaslı, Duygu
dc.date.accessioned2017-09-20T13:58:04Z
dc.date.available2017-09-20T13:58:04Z
dc.date.issued2017-09
dc.date.submitted2017-09-15
dc.identifier.citationPaslı, D., Çinko Oksit ve Bakır Oksit Nanoparçacklarının İn Vitro Sistemler Üzerindeki Toksik Etkilerinin Araştırılması. Hacettepe Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü Farmasötik Toksikoloji Programı Doktora Tezi, Ankara, 2017.tr_TR
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11655/3984
dc.description.abstractZinc oxide (ZnO) and copper oxide (CuO) NPs are commonly used metal nanoparticles with a high toxicity potential. However, information on toxicity mechanisms like other NPs, is limited. In this study, the possible cytotoxic effects of ZnO and CuO NPs on cell lines, either alone or in combination, on mouse fibroblast (L929) and human neuroblastoma (SH-SY5Y) cell lines were assessed and the protective effects of diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA), N-acetylcysteine and taurine have been examined. As a result of MTT and neutral red (NR) experiments, a time- and dose-dependent cytotoxic effect was observed with ZnO NPs, time-dependent cytotoxic effect with CuO NPs and concentration-dependent cytotoxic effect with mixture in L929 cells. Reactive oxygen species (ROS) and mitochondrial membrane potential (MMP) increased, apoptosis and intracellular calcium levels were found to be lower than control levels. CuO and mixture induced autophagy and in the presence of NAC and taurine, these levels were decreased and no increase in IL-6 production was observed. In SH-SY5Y cells, MTT and NK tests resulted in lower cytotoxicity than observed in L929 cell line. It was determined that ROS levels and MMP were elevated with the mixture. Apoptosis was induced, intracellular calcium levels was decreased with this NPs alone or in combination; IL-8 levels were not detected and no increase in IL-6 levels were observed.en
dc.description.sponsorshipBu tez,TÜBİTAK 2211-Yurt İçi Doktora Burs Programı ile HÜBAB Hızlı Destek Projeleri (Proje No: 014 D12 301 001-830 ve Proje Kodu: THD-2017-14012) tarafından desteklenmiştir.tr_TR
dc.description.tableofcontentsONAY SAYFASI iii YAYIMLAMA VE FİKRİ MÜLKİYET HAKLARI BEYANI iv ETİK BEYAN SAYFASI v TEŞEKKÜR vi ÖZET vii ABSTRACT viii İÇİNDEKİLER ix SİMGELER VE KISALTMALAR xiv ŞEKİLLER xviii TABLOLAR xxi 1. GİRİŞ 1 2. GENEL BİLGİLER 3 2.1. Nanoparçacıklar 3 2.1.1. Nanoparçacıkların Fizikokimyasal Özellikleri 5 2.2. Metal Oksit Nanoparçacıkları 8 2.3. Çinko Oksit Nanoparçacıkları 10 2.3.1. ZnO NP’larının Farmakokinetik Özellikleri 13 2.3.2. Çinko Oksit Nanoparçacıklarının İn Vivo Sistemler Üzerindeki Toksik Etkileri 16 2.3.3. Çinko Oksit Nanoparçacıklarının İn Vitro Sistemler Üzerindeki Toksik Etkileri 17 2.3.4. Çinko Oksit Nanoparçacıklarının İnsanlardaki Toksik Etkileri 28 2.3.5. Çinko Oksit Nanoparçacıklarının Genotoksik ve Karsinojenik Etkileri 28 2.4. Bakır Oksit Nanoparçacıkları 29 2.4.1. Bakır Oksit Nanoparçacıklarının Farmakokinetik Özellikleri 31 2.4.2. Bakır Oksit Nanoparçacıklarının İn Vivo Sistemler Üzerindeki Toksik Etkileri 31 x 2.4.3. Bakır Oksit Nanoparçacıklarının İn Vitro Sistemler Üzerindeki Toksik Etkileri 32 2.4.4. Bakır Oksit Nanoparçacıklarının İnsanlar Üzerindeki Toksik Etkileri 35 2.4.5. Bakır Oksit Nanoparçacıklarının Genotoksik ve Karsinojenik Etkileri 35 2.5. Çinko Oksit ve Bakır Oksit Nanoparçacıklarının Çevredeki Toksik Etkileri 35 2.6. Çinko Oksit ve Bakır Oksit Nanoparçacık Karışımlarının Toksik Etkileri 38 2.7. Çinko Oksit ve Bakır Oksit Nanoparçacıklarının Doz ve Maruziyet Sürelerinin Seçilmesi 40 2.8. Dietilentriaminpentaasetik Asit 41 2.9. N-Asetilsistein 42 2.10. Taurin 43 2.11. Hücre Kültürü 44 2.11.1. Fare Fibroblast Hücreleri 46 2.11.2. İnsan Nöroblastoma Hücreleri 47 2.12. Sitotoksisite 49 2.12.1. Mitokondriyal Sitotoksisitenin Belirlenmesi 49 2.12.2. Lizozomal Sitotoksisitenin Belirlenmesi 50 2.13. Oksidatif Stres-Reaktif Oksijen Bileşikleri Oluşumu 50 2.14. Mitokondriyal Membran Potansiyeli 51 2.15. Apopitoz 52 2.16. Nekroz 54 2.17. Otofaji 55 2.18. Hücre İçi Kalsiyum Düzeyi 56 2.19. Sitokinler 57 3. GEREÇ VE YÖNTEM 59 3.1. Kullanılan Kimyasal Maddeler 59 3.2. Kullanılan Araç ve Gereçler 60 xi 3.3. Hazırlanan Süspansiyon, Çözelti ve Reaktifler 63 3.3.1. Fare Fibroblast Hücre Kültürlerinin Hazırlanmasında Kullanılan Çözeltiler 63 3.3.2. İnsan Nöroblastoma Hücre Kültürlerinin Hazırlanmasında Kullanılan Çözeltiler 64 3.3.3. MTT Deneyinde Kullanılan Çözeltiler 64 3.3.4. Nötral Kırmızı Deneyinde Kullanılan Çözeltiler 65 3.3.5. Reaktif Oksijen Bileşikleri Oluşumunun Değerlendirilmesi Deneyinde Kullanılan Çözeltiler 65 3.3.6. Mitokondriyal Membran Potansiyeli Deneyinde Kullanılan Çözeltiler 65 3.3.7 Apopitoz Deneyinde Kullanılan Çözeltiler 66 3.3.8. Otofaji Deneyinde Kullanılan Çözeltiler 66 3.3.9. Kalsiyum Tayini Deneyinde Kullanılan Çözeltiler 67 3.3.10. Fare IL-6 ELISA Kitinde Bulunan ve/veya Hazırlanan Çözeltiler 67 3.3.11. İnsan IL-6 ELISA Kitinde Bulunan ve/veya Hazırlanan Çözeltiler 69 3.3.12. Yüksek Duyarlılıkta İnsan IL-6 ELISA Kitinde Bulunan ve/veya Hazırlanan Çözeltiler 70 3.3.13. İnsan IL-8 ELISA Kitinde Bulunan ve/veya Hazırlanan Çözeltiler 72 3.4. Yöntemler 73 3.4.1. Nanoparçacıkların Tanımlanması 73 3.4.2. Hücre Kültürü Çalışmaları 74 3.5. İstatistiksel Değerlendirme 89 4. BULGULAR 90 4.1. Nanoparçacıkların Karakterizasyonuna İlişkin Bulgular 90 4.1.1. Geçirim Elektron Mikroskobu ile Elde Edilen Görüntülere İlişkin Bulgular 90 4.1.2. Hidrodinamik Boyut ve Zeta Potansiyel Ölçümlerine İlişkin Bulgular 91 4.2. Fare Fibroblast Hücreleri ile Yapılan Deneylere Ait Bulgular 91 xii 4.2.1. Fare Fibroblast Hücreleri ile Yapılan MTT Testlerine İlişkin Sonuçlar 92 4.2.2. Fare Fibroblast Hücreleri ile Yapılan Nötral Kırmızı Alım Testine İlişkin Sonuçlar 100 4.2.3. Fare Fibroblast Hücrelerinde Reaktif Oksijen Türlerinin Ölçülmesine İlişkin Sonuçlar 108 4.2.4. Fare Fibroblast Hücrelerinde Mitokondriyal Membran Potansiyelindeki Değişiklikler 109 4.2.5. Fare Fibroblast Hücrelerinde Apopitozun Ölçülmesine İlişkin Sonuçlar 110 4.2.6. Fare Fibroblast Hücrelerinde Otofaji Düzeylerinin Ölçülmesine İlişkin Sonuçlar 112 4.2.7. Fare Fibroblast Hücrelerinde Hücre İçi Kalsiyum Düzeylerinin Ölçülmesine İlişkin Sonuçlar 114 4.2.8. Fare Fibroblast Hücrelerinde IL-6 Düzeylerinin Ölçülmesine İlişkin Sonuçlar 116 4.3. İnsan Nöroblastoma Hücreleri ile Yapılan Deneylere Ait Bulgular 117 4.3.1. İnsan Nöroblastoma Hücreleri ile Yapılan MTT Testlerine İlişkin Sonuçlar 118 4.3.2. İnsan Nöroblastoma Hücreleri ile Yapılan Nötral Kırmızı Alım Testlerine İlişkin Sonuçlar 126 4.3.3. İnsan Nöroblastoma Hücrelerinde Reaktif Oksijen Türlerinin Ölçülmesine İlişkin Sonuçlar 134 4.3.4. İnsan Nöroblastoma Hücrelerinde Mitokondriyal Membran Potansiyelinin Ölçülmesine İlişkin Sonuçlar 135 4.3.5. İnsan Nöroblastoma Hücrelerinde Apopitozun Ölçülmesine İlişkin Sonuçlar 136 4.3.6. İnsan Nöroblastoma Hücrelerinde Otofajinin Ölçülmesine İlişkin Sonuçlar 138 xiii 4.3.7. İnsan Nöroblastoma Hücrelerinde Hücre İçi Kalsiyum Ölçülmesine İlişkin Sonuçlar 138 4.3.8. İnsan Nöroblastoma Hücrelerindeki IL-6 Düzeylerinin Ölçülmesine İlişkin Sonuçlar 140 4.3.9. İnsan Nöroblastoma Hücrelerinde Ölçülen IL-8 Düzeylerine İlişkin Sonuçlar 143 5. TARTIŞMA 144 5.1. ZnO ve CuO Nanoparçacıklarının TEM Görüntülemesi 145 5.2. ZnO ve CuO Nanoparçacıklarının Sitotoksik Etkileri 145 5.3. ZnO ve CuO Nanoparçacıklarının Reaktif Oksijen Türleri Oluşumuna Etkileri 151 5.4. ZnO ve CuO Nanoparçacıklarının Mitokondriyal Membran Potansiyeline Etkileri 154 5.5. ZnO ve CuO Nanoparçacıklarının Apoptotik Etkileri 157 5.6. ZnO ve CuO Nanoparçacıklarının Otofajik Etkileri 159 5.7. ZnO ve CuO Nanoparçacıklarının Hücre İçi Kalsiyum Düzeyleri Üzerindeki Etkileri 161 5.8. ZnO ve CuO Nanoparçacıklarının İnterlökin Düzeyleri Üzerindeki Etkileri 163 6. SONUÇ VE ÖNERİLER 165 7. KAYNAKLAR 169 8. EKLER EK-1: Tez Çalışması ile İlgili Bildiriler 9. ÖZGEÇMİŞtr_TR
dc.language.isoturtr_TR
dc.publisherSağlık Bilimleri Enstitüsütr_TR
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/closedAccesstr_TR
dc.subjectÇinko oksit nanoparçacıklarıtr_TR
dc.subjectbakır oksit nanoparçacıkları
dc.subjectsitotoksisite
dc.subjectkarışım toksisitesi
dc.subjectMTT
dc.subjectnötral kırmızı
dc.subjectreaktif oksijen bileşikleri
dc.subjectmitokondriyal membran potansiyeli
dc.subjectapopitoz
dc.subjectotofaji
dc.subjecthücre içi kalsiyum düzeyi
dc.subjectinterlökin-6
dc.subjectinterlökin-8
dc.subjectDTPA
dc.subjectNAC
dc.subjecttaurin
dc.titleÇinko Oksit ve Bakır Oksit Nanoparçacıklarının in Vitro Sistemler Üzerindeki Toksik Etkilerinin Araştırılmasıtr_TR
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisen
dc.description.ozetÇinko oksit (ZnO) ve bakır oksit (CuO) NP’ları yaygın olarak kullanılan yüksek toksisite potansiyeline sahip metal nanoparçacıklardır. Ancak, diğer NP’lar gibi toksisite mekanizmaları hakkındaki bilgiler sınırlıdır. Bu çalışmada, ZnO ve CuO NP’larının, tek başlarına veya bir arada, fare fibroblast (L929) ve insan nöroblastoma (SH-SY5Y) hücre hatları üzerindeki olası sitotoksik etkileri değerlendirilmiş, dietilentriaminpentaasetik asit (DTPA), Nasetilsistein (NAC) ve taurinin bu sistemlerdeki koruyucu etkileri incelenmiştir. MTT ve nötral kırmızı (NK) deneyleri sonucunda, L929 hücrelerinde ZnO NP’ları ile zamana ve konsantrasyona, karışım ile konsantrasyon, CuO NP’ları ile ise zamana bağlı bir sitotoksik etki gözlenmiştir. Kontrole göre reaktif oksijen bileşikleri (ROB) ve mitokondriyal membran potansiyeli (MMP)’nin yükseldiği gözlenmiştir. Apopitozun ve hücre içi kalsiyum düzeylerinin kontrolden daha düşük düzeylerde olduğu saptanmıştır. Otofajinin, CuO ve karışım ile indüklendiği, NAC ve taurin varlığında ise bu düzeylerin azaldığı gözlenmiş olup, IL-6 üretiminde herhangi bir artış elde edilmemiştir. SH-SY5Y hücrelerinde ise MTT ve NK testleri sonucunda, L929 hücre hattında gözlenenden daha düşük düzeyde sitotoksisite elde edilmiştir. Karışım ile ROT düzeylerinin ve MMP’nin yükseldiği, belirlenmiştir. Tek başlarına veya karışım NP’ları ile apopitozun indüklendiği, hücre içi kalsiyum düzeylerinin azaldığı belirlenirken; IL-8 düzeyleri saptanamamış, IL-6 düzeylerinde bir artış görülmemiştir.tr_TR
dc.contributor.departmentFarmasötik Toksikolojitr_TR
dc.contributor.authorID59367tr_TR


Files in this item

Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record