dc.contributor.advisor | Vargel, İbrahim | |
dc.contributor.author | Isayeva, Aygün | |
dc.date.accessioned | 2020-09-17T10:50:33Z | |
dc.date.issued | 2019-11-05 | |
dc.date.submitted | 2019-09-27 | |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/11655/22790 | |
dc.description.abstract | The aim of this study is to isolate mesenchymal stem cells from synovial fluid and to
investigate the amount, viability and chondrogenic differentiation potential of these cells
in vitro.
In the first stage of the thesis, synovial fluid aspiration was performed from the knee and
elbow joints of anesthetized young and adult sheep with a 3 G syringe with a 23 G needle
under sterile conditions. In the next stage, isolation of mesenchymal stem cells from
synovial fluid was performed. No MTT test was required for cell viability because the
cells were viable and healthy cells with long fibroblastoid appearance, low granularity,
adhesion and proliferation.
Then, the multipotency properties of synovium (SMKH) derived mesenchymal stem cells
under two conditions, osteogenic and adipogenic growth and differentiation medium,
iv
were investigated. Alizarin Red was used for osteogenic differentiation and Oil Red O
was used for adipogenic differentiation.
As a result, MSCs isolated from synovial fluid obtained from knee and elbow joints of
sheep were morphologically prolonged fibroblast-like, viable cells that adhered to the
culture vessel and proliferated. SMCCs showed osteogenic differentiation in 30-40% and
adipogenic differentiation in 30-40%. Calcification and calcium depots were detected in
the extracellular matrix of cells of SMKHs differentiated to osteoblast precursors at the
end of the 21st day. Osteogenic differentiation was defined by calcium phosphate
accumulation in Alizarin Red stained cells at the end of the 21st day. Adipocytes show
fat cell phenotype. In other words, a large and round droplet of oil is formed in which
triglycerides are collected. | tr_TR |
dc.publisher | Fen Bilimleri Enstitüsü | tr_TR |
dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | tr_TR |
dc.subject | Sinovial Sıvı, MKH, Kondrosit, Sinovial Membran, Adipojenik Farklılaşma, Osteojenik Farklılaşma | tr_TR |
dc.subject | MKH | |
dc.subject | Kondrosit | |
dc.subject | Sinovial membran | |
dc.subject | Adipojenik farklılaşma | |
dc.subject | Osteojenik farklılaşma | |
dc.title | Sinovial Sıvı ve Sinovial Membran Kaynaklı Mezenkimal Kök Hücrelerin Osteojenik, Kondrojenik ve Tendonojenik Farklılaşma Özellikleri | tr_TR |
dc.type | info:eu-repo/semantics/masterThesis | tr_TR |
dc.description.ozet | Sunulan tez çalışmasının amacı sinovyal sıvıdan mezenkimal kök hücre izole edip, bu
hücrelerin miktarının, canlılığının ve ilerleyen dönemlerde in vitro kondrojenik
farklılaşma potansiyellerinin incelenmesidir.
Tez çalışmasının ilk aşamasında anestezi yapılmış genç ve erişkin koyunun diz ve dirsek
eklemlerinden steril koşullarda 23 G iğnesi olan 3 ml şırınga ile sinovyal sıvı aspirasyonu
yapılmıştır. Çalışmanın sonraki aşamasında sinovyal sıvıdan mezenkimal kök hücrelerin
izolasyonu gerçekleştirilmiştir. Hücre canlılığı için MTT testine gerek duyulmadı çünki
hücreler uzun fibroblastoid görünümlü, granülaritesi az, yapışıp çoğalan, canlı ve sağlıklı
hücreler idi.
Daha sonra sinovyum (SMKH) kökenli mezenkimal kök hücrelerin osteojenik ve
adipojenik büyüme ve farklılaşma ortamı olmak üzere iki farklı koşulda multipotensi
özellikleri incelenmiştir. Osteojenik farklılaşma için Alizarin Red, adipojenik farklılaşma
için ise Oil Red O boyama yöntemleri kullanılmıştır.
ii
Sonuç olarak koyunun diz ve dirsek eklemlerinden elde edilen sinovial sıvıdan izole
edilen MKH’ler morfolojik olarak uzun fibroblast görünümlü, canlı, kültür kabına yapışıp
çoğalan hücreler idi. SMKH’ler %30-40 civarında osteojenik ve %30-40 civarında da
adipojenik farklılaşma gösterdi. Osteoblast öncülerine farklılaşan SMKH’lerin hücrelerin
ekstraselüler matriksinde 21. günün sonunda kalsifikasyon ve kalsiyum depoları tespit
edildi. Osteojenik farklılaşma 21. günün sonunda Alizarin Red ile boyanan hücrelerde
kalsiyum fosfat birikimi ile tanımlandı. Adipositlerde ise yağ hücresi fenotipi
görülmektedir. Yani trigliseridlerin toplandığı büyük ve yuvarlak yağ damlacığı ortaya
çıkmaktadır. | tr_TR |
dc.contributor.department | Biyomühendislik | tr_TR |
dc.embargo.terms | Açık erişim | tr_TR |
dc.embargo.lift | 2020-09-19T10:50:34Z | |
dc.funding | Yok | tr_TR |