dc.contributor.advisor | Öner, Ayşe Filiz | |
dc.contributor.advisor | Okay, Sezer | |
dc.contributor.author | Düzenli, Özgün Fırat | |
dc.date.accessioned | 2021-07-27T11:40:28Z | |
dc.date.issued | 2021 | |
dc.date.submitted | 2021-06-24 | |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/11655/25131 | |
dc.description.abstract | Duzenli, O.F., Production of Mycobacterium bovis Antigens in Escherichia coli by
Recombinant DNA Technology and Subunit Vaccine Development, Hacettepe
University Graduate School of Health Sciences Pharmaceutical Biotechnology
Programme PhD Thesis, Ankara, 2021. Tuberculosis is one of the most common
infectious diseases that has not been prevented for many years. BCG vaccine is the
only vaccine approved for use in humans to prevent spread of the disease. However,
the searches continue to solve problems such as protection of BCG vaccine variations
between individuals, and inability to prevent infection. In this context, evaluatation
of the effects of AhpC and LprG proteins playing an important role in the virulence of
M. tuberculosis and M. bovis, on the humoral and cellular immune responses, alone
or as a booster vaccine antigen after BCG prime vaccination was aimed in this thesis
study. In order to achieve this goal, the ahpC and the lprG genes encoding the AhpC
and the LprG proteins, respectively were amplified from the M. bovis genome by
polymerase chain reaction, cloned into the bacterial expression vector, and
recombinantly produced in E.coli. The recombinant proteins were purified by affinity
chromatography and characterized by electrophoresis and immunoblotting methods.
Subsequently, recombinant AhpC and LprG proteins were formulated with
Montanide ISA 61VG, an oil-based emulsion adjuvant. The humoral and cellular
immune responses were investigated by using ELISA method. Evaluation of humoral
response based on IgG measurement and cellular response based on IL-12
measurement in mice sera showed that both proteins are effective as vaccine
antigens. It was concluded that AhpC vaccine can be a good booster vaccine
candidate, and LprG vaccine may be more effective when administered alone. | tr_TR |
dc.publisher | Sağlık Bilimleri Enstitüsü | tr_TR |
dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | tr_TR |
dc.rights | Attribution 3.0 United States | * |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/us/ | * |
dc.subject | Tüberküloz | tr_TR |
dc.subject | Prime-boost bağışıklama | tr_TR |
dc.subject | Alt birim aşı | tr_TR |
dc.subject | LprG | tr_TR |
dc.subject | AhpC | tr_TR |
dc.subject.lcsh | Eczacılık bilimi | tr_TR |
dc.title | Mycobacterium bovis Antijenlerinin Escherichia coli’de Rekombinant DNA Teknolojisi ile Üretimi ve Alt Birim Aşı Geliştirilmesi | tr_TR |
dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | tr_TR |
dc.description.ozet | Düzenli, Ö.F., Mycobacterium bovis Antijenlerinin Escherichia coli’de Rekombinant
DNA Teknolojisi ile Üretimi ve Alt Birim Aşı Geliştirilmesi, Hacettepe Üniversitesi
Sağlık Bilimleri Enstitüsü Farmasötik Biyoteknoloji Programı Doktora Tezi, Ankara,
2021. Tüberküloz, uzun yıllardan beri hala önlenememiş en yaygın bulaşıcı
hastalıklardan birisidir. Hastalığın yayılmasının önlenmesi amacıyla insanlarda
kullanımı onaylanmış tek aşı BCG aşısıdır. Ancak BCG aşısının koruyuculuğunun kişiler
arasında değişkenlik göstermesi, enfeksiyonu önleyememesi gibi sorunları çözmek
üzere arayışlar devam etmektedir. Bu bağlamda bu tez çalışmasında M. tuberculosis
ve M. bovis’in virülansında önemli rol oynayan AhpC ve LprG proteinlerinin hem kendi
başlarına hem de BCG ile prime aşılamanın ardından booster aşı antijeni olarak
uygulanmaları ile hümoral ve hücresel bağışıklık yanıt üzerindeki etkilerinin
değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Bu amaçla AhpC proteinini kodlayan ahpC ve LprG
proteinlerini kodlayan lprG geni M. bovis genomundan polimeraz zincir reaksiyonu ile
çoğaltılmış, bakteriyel ifadeleme vektörüne klonlanmış ve E.coli’de rekombinant
olarak üretilmiştir. Rekombinant proteinler afinite kromatografisi ile saflaştırılmış,
elektroforez ve immünoblotlama yöntemleriyle karakterize edilmiştir. Ardından,
rekombinant AhpC ve LprG proteinlerinin yağ bazlı emülsiyon yapıda bir adjuvan olan
Montanide ISA 61VG ile formülasyonları hazırlanmıştır. Aşılar farelere uygulandıktan
sonra gelişen hümoral ve hücresel bağışıklık yanıtları ELISA yöntemine dayanan
deneylerle araştırılmıştır. Fare serumlarında IgG ölçümüne dayanan hümoral yanıt ve
IL-12 ölçümüne dayanan hücresel yanıt değerlendirmeleri her iki proteinin de aşı
antijeni olarak etkili olduğunu göstermiştir. AhpC aşısının iyi bir booster aşı adayı
olabileceği, LprG aşısının ise tek başına daha etkili olabileceği sonucuna varılmıştır. | tr_TR |
dc.contributor.department | Farmasötik Biyoteknoloji | tr_TR |
dc.embargo.terms | Acik erisim | tr_TR |
dc.embargo.lift | 2021-07-27T11:40:28Z | |
dc.funding | Bilimsel Araştırma Projeleri KB | tr_TR |