Show simple item record

dc.contributor.advisorAlten , Salih Bülent
dc.contributor.authorÖncü , Ceren
dc.date.accessioned2017-07-25T10:16:34Z
dc.date.available2017-07-25T10:16:34Z
dc.date.issued2017
dc.date.submitted2017-06-21
dc.identifier.citationOncu, C., Trakya Bölgesi’nde Sivrisinek Flavivirüslerinin Tespiti Ve Kısmi Genomik Karakterizasyonu, Yüksek Lisans Tezi, Hacettepe Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü, Ankara, 2017.tr_TR
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11655/3763
dc.description.abstractFlavivirus genus of the family Flaviviridae includes mosquito-borne viruses with significant global health impact, such as West Nile, Dengue and Zika viruses. Moreover, certain flaviviruses only infect various mosquito species and complete their replication cycle without the involvement of vertebrate hosts. Arthropod surveillance provides information on regional vector-borne or non-pathogenic virus circulation, for understanding virus epidemiology and risk assessment. In this study, we carried out flavivirus screening in mosquitoes via generic PCR, in eastern Thrace region with previously documented West Nile and mosquito flavivirus activity. The detected strains were characterized via sequencing. A total of 1461 mosquitoes were collected from 38 localities in 3 provinces, during August-September, 2016. Morphological identification revealed Culex pipiens s.l. (54,4%) to be the most abundant species, followed by Anopheles maculipennis s.l. (25,6%), Aedes albopictus (6,1%), Aedes caspius (5,7%) and others. The individuals were pooled in a total of 104 specimens, according to species, sex and collection sites. Flavivirus screening provided positive results in 5.7% of the pools (6/104). A sequence with the highest nucleotide homology to the Anopheles flavivirus variant 1 was characterized in a pools with An. maculipennis mosquitoes, collected around Edirne province. Comparison of nucleotide and putative amino acid sequences revealed the strain as a candidate for a novel flavivirus. In five pools comprising Ur. unguiculata, Ae. caspius ve Cx. pipiens s.l. mosquitoes, another novel sequence, characterized previously in Ur. unguiculata species around Edirne province, was detected. In two Ur. unguiculata pools comprising male and female individuals, DNA forms of the particular flavivirus was identified. Although sequencing reads from these specimens were partial and fragmented, they were well-conserved and retained protein coding capacity. This is the first detection of RNA and DNA forms of a particular mosquito flavivirus in field-collected specimens, confirming the occurence of these forms during infections in nature.tr_TR
dc.description.abstractFlavivirus genus of the family Flaviviridae includes mosquito-borne viruses with significant global health impact, such as West Nile, Dengue and Zika viruses. Moreover, certain flaviviruses only infect various mosquito species and complete their replication cycle without the involvement of vertebrate hosts. Arthropod surveillance provides information on regional vector-borne or non-pathogenic virus circulation, for understanding virus epidemiology and risk assessment. In this study, we carried out flavivirus screening in mosquitoes via generic PCR, in eastern Thrace region with previously documented West Nile and mosquito flavivirus activity. The detected strains were characterized via sequencing. A total of 1461 mosquitoes were collected from 38 localities in 3 provinces, during August-September, 2016. Morphological identification revealed Culex pipiens s.l. (54,4%) to be the most abundant species, followed by Anopheles maculipennis s.l. (25,6%), Aedes albopictus (6,1%), Aedes caspius (5,7%) and others. The individuals were pooled in a total of 104 specimens, according to species, sex and collection sites. Flavivirus screening provided positive results in 5.7% of the pools (6/104). A sequence with the highest nucleotide homology to the Anopheles flavivirus variant 1 was characterized in a pools with An. maculipennis mosquitoes, collected around Edirne province. Comparison of nucleotide and putative amino acid sequences revealed the strain as a candidate for a novel flavivirus. In five pools comprising Ur. unguiculata, Ae. caspius ve Cx. pipiens s.l. mosquitoes, another novel sequence, characterized previously in Ur. unguiculata species around Edirne province, was detected. In two Ur. unguiculata pools comprising male and female individuals, DNA forms of the particular flavivirus was identified. Although sequencing reads from these specimens were partial and fragmented, they were well-conserved and retained protein coding capacity. This is the first detection of RNA and DNA forms of a particular mosquito flavivirus in field-collected specimens, confirming the occurence of these forms during infections in nature.tr_TR
dc.description.tableofcontentsÖZET i ABSTRACT iii TEŞEKKÜR v İÇİNDEKİLER vi ÇİZELGELER DİZİNİ ix ŞEKİLLER DİZİNİ xi SİMGELER VE KISALTMALAR xiii 1. GİRİŞ 1 2. GENEL BİLGİLER 3 2.1. Sivrisinekler ve Genel Özellikleri 3 2.2. Eklembacaklı Kaynaklı Virüsler 4 2.3. Flavivirüslerin Yapısı ve Genel Özellikleri 7 2.4. Flavivirüslerde Hücre İçi Replikasyon 9 2.5. Flavivirüs Konakları ve Yayılım 10 2.6 Türkiye’de Flavivirüsler 15 3. YÖNTEM 18 3.1. Arazi Çalışmaları 18 3.2. Laboratuvar Çalışmaları 19 3.2.1. Sivrisinek havuzlarında homojenizasyon ve nükleik asit saflaştırılması 19 3.2.2. Komplementer DNA (cDNA) Sentezi 21 3.2.3. Örneklerinde Flavivirüs RNA'sının Araştırılması 22 3.2.4. Amplifikasyon ürünlerinin agaroz jel elektroforezinde görüntülenmesi 25 3.2.5. Sivrisineklerde tespit edilen flavivirüslerin tanımlanması 26 4. BULGULAR 28 4.1. Toplanan örnek sayısı ve dağılımı 28 4.2. Sivrisinek Örneklerinde Flavivirüs İncelemeleri 30 5. TARTIŞMA 38 KAYNAKLAR 44 EKLER 51 ÖZGEÇMİŞ 53tr_TR
dc.description.tableofcontentsÖZET i ABSTRACT iii TEŞEKKÜR v İÇİNDEKİLER vi ÇİZELGELER DİZİNİ ix ŞEKİLLER DİZİNİ xi SİMGELER VE KISALTMALAR xiii 1. GİRİŞ 1 2. GENEL BİLGİLER 3 2.1. Sivrisinekler ve Genel Özellikleri 3 2.2. Eklembacaklı Kaynaklı Virüsler 4 2.3. Flavivirüslerin Yapısı ve Genel Özellikleri 7 2.4. Flavivirüslerde Hücre İçi Replikasyon 9 2.5. Flavivirüs Konakları ve Yayılım 10 2.6 Türkiye’de Flavivirüsler 15 3. YÖNTEM 18 3.1. Arazi Çalışmaları 18 3.2. Laboratuvar Çalışmaları 19 3.2.1. Sivrisinek havuzlarında homojenizasyon ve nükleik asit saflaştırılması 19 3.2.2. Komplementer DNA (cDNA) Sentezi 21 3.2.3. Örneklerinde Flavivirüs RNA'sının Araştırılması 22 3.2.4. Amplifikasyon ürünlerinin agaroz jel elektroforezinde görüntülenmesi 25 3.2.5. Sivrisineklerde tespit edilen flavivirüslerin tanımlanması 26 4. BULGULAR 28 4.1. Toplanan örnek sayısı ve dağılımı 28 4.2. Sivrisinek Örneklerinde Flavivirüs İncelemeleri 30 5. TARTIŞMA 38 KAYNAKLAR 44 EKLER 51 ÖZGEÇMİŞ 53tr_TR
dc.language.isoturtr_TR
dc.publisherFen Bilimleri Enstitüsütr_TR
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccesstr_TR
dc.subjectBatı Nil Virüsütr_TR
dc.subjectFlavivirüs
dc.subjectSivrisinek
dc.subjectTrakya
dc.subjectDNA
dc.titleTrakya Bölgesi'nde Sivrisinek Flavivirüslerinin Tespiti ve Kısmi Genomik Karakterizasyonutr_TR
dc.title.alternativeIdentification And Partial Genomic Characterization Of Mosquito Flaviviruses In Thrace Regiontr_en
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesistr_TR
dc.description.ozetFlaviviridae ailesi Flavivirüs cinsi, sivrisineklerle bulaşma gösteren, aralarında Batı Nil, Deng, Zika virüs gibi, tüm dünyada önemli sağlık sorunu oluşturmuş virüsleri içermektedir. Bazı flavivirüsler, sivrisinekleri enfekte etmekte ve yaşam döngülerini çeşitli tür sivrisineklerde tamamlamaktadır. Belirli bir bölgede vektör kaynaklı ya da patojen olmayan virüs aktivitesinin bilinmesi, hastalık riskinin değerlendirilebilmesi ve epidemiyolojik özelliklerin incelenebilmesi için, eklembacaklıların sürveyansı önem taşımaktadır. Bu çalışmada, önceden Batı Nil virüsü olguları ve maruziyetinin saptandığı, ayrıca çeşitli sivrisinek flavivirüslerinin ilk kez rapor edildiği Trakya bölgesinden toplanan örneklerde jenerik PZR yöntemiyle flavivirüsler araştırılmış, saptanan virüsler DNA dizi analizi ile tanımlanmış ve bulgular tartışılmıştır. Çalışma kapsamında 2016 yılı Ağustos-Eylül aylarında 3 ilde 38 lokalitede standart yöntemlerle örnekleme sonucu, 1461 sivrisinek örneği toplanmıştır. Morfolojik incelemeler, örnekler arasında en sık saptanan türün Culex pipiens s.l. (%54,4) olduğunu göstermiş, bunu Anopheles maculipennis s.l. (%25,6), Aedes albopictus (%6,1), Aedes caspius (%5,7) ve diğerleri takip etmiştir. Toplanan örnekler; bölge, cinsiyet ve türe göre toplam 104 havuz olarak virüs taramasına alınmış, % 5.7’sinde (6/104) pozitiflik saptanmıştır. Edirne ili çevresi kaynaklı An. maculipennis s.l. örnekleri içeren bir havuzda Anofeles flavivirüsü varyantı 1 ile en yüksek homoloji gösteren bir dizi karakterize edilmiş, nükleotid ve amino asit karşılaştırmaları, saptanan virüsün yeni bir flavivirüs olarak tanımlanabileceğini ortaya koymuştur. Ur. unguiculata, Ae. caspius ve Cx. pipiens s.l. örnekleri içeren toplam beş havuzda ise, Edirne çevresinde Ur. unguiculata türlerinde daha önceden tespit edilen, ancak kesin olarak tanımlanamamış bir flavivirüse yakınlık gösteren diziler tanımlanmıştır. Dişi ve erkek Ur. unguiculata örnekleri içeren iki havuzda da aynı virüse ait DNA formları saptanmıştır. Bu formlardan parçalı ve kısmi okumalar elde edilebilmiş, ancak dizilerin iyi korunmuş olduğu ve kodlama yapabilecek özellikte olduğu izlenmiştir. Böylece doğadan toplanmış sivrisinek örneklerinde aynı flavivirüse ait RNA ve DNA formlarının ilk kez gösterilmiştir, doğal enfeksiyonlar sırasında bu formların oluşabildiği ortaya konulmuştur.tr_TR
dc.contributor.departmentBiyolojitr_TR
dc.contributor.authorID10156291tr_TR


Files in this item

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record