| dc.contributor.advisor | Yavuz Alagöz, Handan | |
| dc.contributor.author | Sari Üzek, Esma | |
| dc.date.accessioned | 2017-02-01T11:51:08Z | |
| dc.date.available | 2017-02-01T11:51:08Z | |
| dc.date.issued | 2017 | |
| dc.date.submitted | 2017-01-12 | |
| dc.identifier.citation | E. Sari Üzek, “Prednisolon Tayini için Yüzey Tanıma Bölgelerine Sahip Moleküler Baskılanmış Sensörlerin Geliştirilmesi (Ph. D. Thesis). Hacettepe Üniversitesi,” Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Anabilim Dalı, Ankara, 2017. | tr_TR |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/11655/3132 | |
| dc.description.abstract | In this thesis, molecularly imprinted optical sensors with surface recognition regions for prednisolone (PRD) determination have been prepared. Within the scope of this study, nanoparticles were prepared by two-phase mini-emulsion polymerization by changing amount of PRD, which is a template molecule, and the particles were attached to the gold chip surface of the surface plasmon resonance sensor with different techniques. Three differentially imprinted particles (PIN1, PIN2, and PIN3) and one non-imprinted particle (NIN) were first characterized by dimensional analysis (Zeta-sizer and STEM) and then structurally (FTIR and elemental analysis). After the chip surface has been modified with particles, the nanosensors were characterized by means of ellipsometer and contact angle measurements. Kinetic analyzes were performed for four sensors at pH 6.6 and 7.4 and Langmuir, Freundlich, Scathard and Langmuir-Freundlich isotherm models were applied to the data. As a result of the kinetic analyzes, the limit of detection for the PIN1, PIN2, PIN3 and NIN sensors at pH 6.6 were 5.1 ppb, 5.5 ppb, 6.9 ppb and 7.4 ppb, respectively, while the limit of quantifications were determined as 16.9 ppb, 18.2 ppb, 23.1 ppb and 24.2 ppb, respectively. The limit of detection at pH 7.4 was calculated as 10.7 ppb, 8.9 ppb, 13.7 ppb and 12.1 ppb in the same order, and the limit of quantification were calculated as 35.5 ppb, 29.7 ppb, 45.5 ppb and 40.2 ppb, respectively. Competition kinetic assays were performed by using 17-a-ethynyl estradiol (EEST) and estradiol (EST). Imprinted sensors labeled with PIN1, PIN2 and PIN3 codes were selected 1.195; 6.500 and 1.699 times more sensitive to the PRD than EEST when it is compared with non-imprinted NIN-encoded sensor, respectively, and these values were determined as 1.676; 7.857 and 2.037 times for EST at pH 6.6. At pH 7.4, the relative selectivity coefficients were calculated as 3.009; 10.556; 2.679 and 2.758; 14.778; 4.500 times for EEST and EST, respectively. The reusability studies have been applied to the sensor with the best results and 92.8 % recovery is achieved. The method was successfully applied to monitor PRD levels in body fluids (urine and plasma) as a naturel sample. Validation studies of the system were performed according to the standard procedure by high performance liquid chromatography (HPLC). Proposed SPR sensor method was in good agreement with those obtained by HPLC method. | tr_TR |
| dc.description.tableofcontents | ETİK
ÖZET
ABSTRACT
TEŞEKKÜRLER
İÇİNDEKİLER
ÇİZELGELER DİZİNİ
ŞEKİLLER DİZİNİ
SİMGELER VE KISALTMALAR
1. GİRİŞ
2. GENEL BİLGİLER
2.1 Moleküler Baskılanmış Polimerlerin Temelleri
2.2 Moleküler Baskılamanın Temel Unsurları
2.2.1 Kalıp (Hedef) molekül
2.2.2 Fonksiyonel monomerler
2.2.3 Çapraz bağlayıcı monomerler
2.2.4 Gözenek oluşturucu çözgenler (Porojenler)
2.2.5 Başlatıcılar
2.3 MIP’lerin hazırlama yöntemleri
2.3.1 Polimerik Nanopartiküllerin Hazırlanması
2.3.1.1 Var olan Polimerlerin Dispersiyonu
2.3.1.1.1 Çözücünün Buharlaştırılması
2.3.1.1.2 Tuzla Çöktürme
2.3.1.1.3 Nanoçöktürme
2.3.1.1.4 Diyaliz
2.3.1.1.5 Süperkritik Akışkan Teknolojisi
2.3.1.2 Monomerlerin Polimerizasyonu
2.3.1.2.1 Emülsiyon Polimerizasyonu
2.3.1.2.2 Mini-emülsiyon Polimerizasyonu
2.3.1.2.3 Mikro-emülsiyon Polimerizasyonu
2.4 Moleküler Baskılama Teknolojisi
2.4.1 Yeni nesil baskılama teknolojileri
2.4.1.1 Yüzey baskılama teknolojisi
2.4.1.2 Nanobaskılama teknolojisi
2.4.1.3 Kontrollü/yaşayan radikalik polimerizasyon teknolojisi
2.4.1.4 Oyuk (hollow) gözenekli polimer sentez teknolojisi
2.4.1.5 Click kimyası (huisgen tepkimesi) siklokatılma tepkimesi
2.4.1.6 Mikroakışkan sentez teknolojisi
2.4.1.7 Katı faz sentez teknolojisi
2.4.2 Moleküler baskılama teknolojisindeki özel baskılama stratejileri
2.4.2.1 Çok kalıp moleküllü baskılama stratejisi
2.4.2.2 Çok fonksiyonel monomerli baskılama stratejileri
2.4.2.3 Taklit kalıp molekül ile baskılama stratejisi
2.4.2.4 Segment (Katman) baskılama stratejisi
2.4.2.5 Kompozit baskılama malzeme stratejisi
2.4.3 Uyaran duyarlı moleküler baskılama teknolojisi stratejileri
2.4.3.2 Sıcaklık duyarlı moleküler baskılama teknolojisi
2.4.3.3 Işık duyarlı moleküler baskılama teknolojisi
2.4.3.4 pH duyarlı moleküler baskılama teknolojisi
2.4.3.5 İkili/çoklu uyaran duyarlı moleküler baskılama teknolojisi
2.5 Moleküler Baskılanmış Polimerlerin Kullanım Alanları
2.6 Yüzey Plazmon Rezonans
2.6.1 Yüzey Plazmon Rezonans Genel Prensibi
2.7 Prednisolon
3. DENEYSEL ÇALIŞMALAR
3.1 Malzemeler
3.1.2 Kullanılan Kimyasallar
3.1.3 Kullanılan laboratuvar ekipmanları
3.2 Yöntem
3.2.1 Nanopartiküllerin Hazırlanması
3.2.2 Nanopartiküllerin Karakterizasyonu
3.2.2.1 Boyut Analizi
3.2.2.2 Taramalı-Geçirgenlik Elektron Mikroskobu (STEM) Analizi
3.2.2.3 Zayıflatılmış Toplam Yansıma - Fourier Dönüşümlü Kızılötesi Spektroskopisi (FTIR-ATR) Analizi
3.2.2.4 Elementel Analizi
3.2.3 Nanopartiküllerin Yüzey Plazmon Rezonans Sensör Yüzeyine Tutturulması
3.2.4 Yüzey Plazmon Rezonans Sensörün Karakterizasyonu
3.2.4.1 Elipsometre Analizi
3.2.4.2 Temas Açısı Analizi
3.2.5 Yüzey Plazmon Rezonans Sistemi ile Kinetik Analizler
3.2.6 Yüzey Plazmon Rezonans Sisteminin Seçiciliğinin Belirlenmesi
3.2.7 Yüzey Plazmon Rezonans Sisteminin Tekrar Kullanılabilirliğinin Belirlenmesi
3.2.8 Yüzey Plazmon Rezonans Sisteminin Doğal Kaynaklarla Kinetik Analizi
3.2.9 Yüzey Plazmon Rezonans Sisteminin Validasyonu
4. SONUÇLAR VE TARTIŞMA
4.1. Baskılanmış ve Baskılanmamış Nanopartiküllerin Karakterizasyonu
4.1.1. Boyut Analizi
4.1.2. Taramalı-Geçirgenlik Elektron Mikroskobu (STEM) ve Geçirgenlik Elektron Mikroskobu (TEM) Analizi
4.1.2. Zayıflatılmış Toplam Yansıma - Fourier Dönüşümlü Kızılötesi Spektroskopisi (FTIR-ATR) Analizi
4.1.2. Elementel Analizi
4.2. Baskılanmış ve Baskılanmamış Nanosensörlerin Karakterizasyonu
4.2.1. Elipsometre Analizi
4.1.2. Temas Açısı Analizi
4.3. Yüzey Plazmon Rezonans Sensörlerin Kinetik Analizleri
4.3.1. Denge Analizleri
4.3.2. Bağlanma Kinetik Analizleri
4.3.3. İzoterm Modelleri
4.4. SPR Nanosensörün Yarışmalı Kinetik Veri Analizleri ve Baskılama Seçiciliğinin Belirlenmesi
4.5. SPR Nanosensörün Tekrar Kullanabilirliğinin Belirlenmesi
4.6. Doğal Kaynak ile Kinetik Veri Analizleri
4.7. Yüzey Plazmon Rezonans Sisteminin Validasyonu
5. YORUM
KAYNAKLAR
ÖZGEÇMİŞ | tr_TR |
| dc.language.iso | tur | tr_TR |
| dc.publisher | Fen Bilimleri Enstitüsü | tr_TR |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | tr_TR |
| dc.subject | Prednisolon | tr_TR |
| dc.title | Prednisolon Tayini için Yüzey Tanıma Bölgelerine Sahip Moleküler Baskılanmış Sensörlerin Geliştirilmesi | tr_TR |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | tr_TR |
| dc.contributor.departmentold | Yüzey plazmon rezonans | |
| dc.contributor.departmentold | Nanosensör | |
| dc.contributor.departmentold | Validasyon | |
| dc.description.ozet | Bu tez çalışması kapsamında Prednisolon (PRD) tayinine yönelik yüzey tanıma bölgelerine sahip moleküler baskılanmış optik sensörler hazırlanmıştır. Çalışma kapsamında kalıp molekül olan prednisolon miktarı değiştirilerek iki fazlı mini-emülsiyon polimerizasyonuyla nanopartiküller hazırlanmış ve yüzey plasmon rezonans sensörün altın çip yüzeyine farklı tekniklerle tutturulmuştur. Hazırlanmış olan üç farklı baskılanmış partikül (PIN1, PIN2 ve PIN3) ve bir tane baskılanmamış partikül (NIN) ilk olarak boyut analiziyle (Zeta-sizer ve STEM) ve yapısal olarak (FTIR ve elementel analiz) karakterize edilmiştir. Çip yüzeyi modifiye edildikten sonra nanosensörler elipsometre ve temas açısı ölçümleri vasıtasıyla karakterize edilmiştir. Kinetik analizler pH 6.6 ve 7.4’de dört sensör içinde gerçekleştirilmiş ve verilere Langmuir, Freundlich, Scathard ve Langmuir-Freundlich izoterm modelleri uygulanmıştır. Kinetik analizler sonucunda pH 6.6’da PIN1, PIN2, PIN3 ve NIN kodlu sensörler için elde edilen tayin limiti sırasıyla 5.1 ppb, 5.5 ppb, 6.9 ppb ve 7.4 ppb iken tayin alt sınırı 16.9 ppb, 18.2 ppb, 23.1 ppb ve 24.2 ppb olarak belirlenmiştir. pH 7.4 belirlenen tayin limiti ise aynı sıralamayla 10.7 ppb, 8.9 ppb, 13.7 ppb ve 12.1 ppb olarak hesaplanırken tayin alt sınırları sırasıyla 35.5 ppb, 29.7 ppb, 45.5 ppb ve 40.2 ppb olarak hesaplanmıştır. Yarışmalı kinetik analizler 17-α-etinil estradiol (EEST) ve estradiol (EST) kullanılarak gerçekleştirilmiştir. pH 6.6’da baskılanmış PIN1, PIN2 ve PIN3 kodlu sensörler baskılanmamış NIN kodlu sensöre göre PRD’yi EEST’den sırasıyla 1.195; 6.500 ve 1.699 kat daha seçici tanırken bu değerler EST için 1.676; 7.857 ve 2.037 kat olarak belirlenmiştir. pH 7.4’de ise bağıl seçicilik katsayıları EEST ve EST için sırasıyla 3.009; 10.556; 2.679 ve 2.758; 14.778; 4.500 kat olarak hesaplanmıştır. Tekrar kullanılabilirlik çalışmaları en iyi sonuçların elde edildiği sensöre uygulanmış ve % 92.8 geri kazanım elde edilmiştir. Doğal örnek olarak vücut sıvılarıyla (idrar ve plazma) çalışılmıştır. Sistemin validasyon çalışmaları yüksek performaslı sıvı kromatografisi (HPLC) ile standart yönteme uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Hazırlanan SPR sensörünün HPLC sonuçlarıyla iyi bir uyum içinde olduğu gösterilmiştir. | tr_TR |
| dc.contributor.department | Kimya | tr_TR |
